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Spontaneous and calcium ionophore-induced acrosome reaction in human sperm

ALESSANDRO SCHUFFNER;
DANIEL FRANKEN, UNIVERSITY OF STELLENBOSCH, ÁFRICA DO SUL;
MAHMOOD MORSHEDI, JONES INSTITUTE FOR REPRODUCTIVE MEDICINE, EUA;
SERGIO OEHNINGER, JONES INSTITUTE FOR REPRODUCTIVE MEDICINE, EUA

Resumo: The objective of these studies was to assess the relationships between capacitation time and conditions, plasma membrane translocation of phosphatidylserine (PS) and protein tyrosine phosphorylation, and the spontaneous and agonist-induced acrosome reaction of human spermatozoa. Purified populations of highly motile sperm were incubated in human tubal fluid (HTF) supplemented with varying doses of human serum albumin (HSA) and examined at 0, 3, 6, 12 and 24 hours. Acrosome reaction of live sperm was detected by fluorescein isothiocyanate-labelled Pisum Sativum Agglutinin/Hoechst; annexin V binding was used to monitor PS translocation; tyrosine phosphorylation was examined by immunoblotting. The percentage of live, acrosome reacted sperm and the percentage of live sperm depicting PS translocation increased significantly over time, both under spontaneous- and calcium ionophore- treated conditions. Under spontaneous conditions there was a significant positive correlation beteen the percentage of live, acrosome reacted sperm and the percentage of live sperm with PS translocation. Tyrosine phosphorylation increased over time and with higher doses of HSA, and was associated with increased PS externalization. Taken together, these results suggest that the spontaneous acrosome reaction of human spermatozoa incubated under conditions that support capacitation is time dependent, is positively associated with changes in plasma membrane lipid distribution resulting in externalization of PS, and is accompanied by tyrosine phosphorylation. The responses to the agonistic effect of a calcium ionophore appear to result in different membrane dynamics.

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ASSOCIAÇÃO ENTRE CONCENTRAÇÃO, MOTILIDADE E MORFOLOGIA DE ESPERMATOZÓIDES HUMANOS E A PORCENTAGEM DE APOPTOSE E PEROXIDAÇÃO LIPÍDICA ANTES E APÓS O SEU CONGELAMENTOALESSANDRO SCHUFFNER;

SERGIO OEHNINGER, JONES INSTITUTE FOR REPRODUCTIVE MEDICINE;

ALMIR URBANETZ, DEP. TOCOGINECOLOGIA – UFPR

Resumo: O objetivoé avaliar se existe associação entre a concentração de espermatozóides, a sua motilidade e morfologia e a porcentagem de apoptose e peroxidação lipídica antes e após o congelamento/descongelamento. A translocação da fosfatidilserina da membrana plasmática dos espermatozóides foi avaliada através da aderência à anexina V; a peroxidação lipídica através de espectrofotometria e parâmetros da motilidade através da análise computadorizada. : Houve uma maior porcentagem de espermatozóides apoptóticos antes do congelamento, em pacientes com menor concentração de espermatozóides (41,4%) quando comparado com pacientes com maior concentração de espermatozóides (23,6%) (P=0,01) e uma menor porcentagem de espermatozóides vivos 49,7% e 73,4%, respectivamente (P=0,005). Após o congelamento, a porcentagem de espermatozóides vivos foi menor em pacientes com menor concentração de espermatozóides (42,6%) em relação à pacientes com maior concentração de espermatozóides (56,1%) P=0,07). Não houve qualquer associação entre a morfologia espermática e aderência à anexina V. Também não houve associação entre peroxidação lipídica antes do congelamento ou após o descongelamento e qualquer parâmetro da análise seminal básica. Em homens com menor concentração espermática houve uma maior proporção de espermatozóides com apoptose antes do congelamento e após. Não foi encontrado associação entre a motilidade e morfologia com a apoptose antes do congelamento ou após. A peroxidação lipídica antes do congelamento e após o descongelamento, não apresentou associação com qualquer parâmetro da análise seminal básica.